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          32D clone 3細胞ATCC CRL-11346

          價格:2500元

          聯系方式:I47-825O-882O

          買家導航

          32D clone 3細胞ATCC CRL-11346標準細胞株基本信息

          細胞名稱: 32D clone 3細胞, ATCC CRL-11346 細胞, 32Dcl3細胞, 小鼠IL-3依賴性細胞
          細胞又名: 32D clone 3; 32D clone3; 32D-Cl3; 32D.cl3; 32D:cl3; 32D/cl3; 32D CL3; 32D cl3; 32Dc3; 32D.3
          細胞來源: ATCC
          產品貨號: CRL-11346
          種屬來源: 小鼠
          組織來源: 骨髓
          細胞形態: 淋巴母細胞樣
          生長特性: 貼壁或懸浮生長
          培養基: RPMI-1640 +10%FBS +小鼠白細胞介素-3。
          生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, 
          傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
          凍存條件: 95% 完全培養基+5% DMSO,液氮儲存
          支原體檢測: 陰性
          安全等級: 1
          應用: 該細胞可以作為轉染宿主細胞。
          細胞說明:
          此細胞系依賴于IL-3。
          該細胞系最初被支原體污染,并通過BM環素治療治愈。
          治療6周后,用Hoechst染色、PCR和標準培養試驗對細胞進行支原體檢測。所有測試均為陰性。
          參考文獻:
          Migliaccio G., Migliaccio A.R., Kreider B.L., Rovera G., Adamson J.W.
          Selection of lineage-restricted cell lines immortalized at different stages of hematopoietic differentiation from the murine cell line 32D.
          J. Cell Biol. 109:833-841(1989)

           

          32D clone 3細胞ATCC CRL-11346 小鼠IL-3依賴性細胞接受后處理

          1)  收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請 拍照片發給我們。
           
          2)  請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口 膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
           
          3)  棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的 完全培養基。
           
          4)  如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代, 傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
           
          5)  接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現 污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
           

          32D clone 3細胞ATCC CRL-11346 小鼠IL-3依賴性細胞培養操作

          1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將 細胞懸液 加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
           
          2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
           
               1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
           
               2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消 化。
               
               3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清 液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
           
               4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
           
          3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
           
                1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
           
                2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加入血 清和 DMSO ,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍存管做好標識。
           
               3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲 存。記錄凍存 管位置以便下次拿取。

          32D clone 3細胞ATCC CRL-11346 小鼠IL-3依賴性細胞培養注意事項

          1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及時和我們聯系。
           
          2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子等,確保細胞培 養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。
           
          3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶壁脫落,將細 胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證 實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確 認后我們為您再免費寄送一次。
           
          4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待細 胞匯合度  80% 左右時正常傳代。
           
          5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以一定比例和客戶 自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
           
          6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 Procell 技術 部溝通交流。由 于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問 題解決。
           
          7. 該細胞僅供科研使用。



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          32D clone 3細胞ATCC CRL-11346標準細胞株應用舉例

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